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==[http://champignonscomestibles.com/faire-une-empreinte-de-spores/ Réaliser une Empreinte de spores]== | ==[http://champignonscomestibles.com/faire-une-empreinte-de-spores/ Réaliser une Empreinte de spores]== | ||
[[Image:Empreinte-de-spore11.jpg|thumb|Empreinte de spore]] | |||
===Matériel nécessaire=== | ===Matériel nécessaire=== | ||
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Conservation : 1 an max | Conservation : 1 an max | ||
==Réaliser une Culture Liquide== | ==[https://www.psychoactif.org/forum/2020/04/24/Tutoriel-preparer-Culture-Liquide_51803_1.html#divx/ Réaliser une Culture Liquide]== | ||
[[Image:Culture_liquide.jpg|thumb|culture liquide : innoculation des pots]] | |||
Avantages par rapport à la seringue de spores : | Avantages par rapport à la seringue de spores : | ||
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Pour plus d'info voir le tutoriel [https://www.psychoactif.org/forum/2020/04/24/Tutoriel-preparer-Culture-Liquide_51803_1.html#divx Réaliser une culture liquide] | Pour plus d'info voir le tutoriel [https://www.psychoactif.org/forum/2020/04/24/Tutoriel-preparer-Culture-Liquide_51803_1.html#divx Réaliser une culture liquide] | ||
==Réaliser une PF-Tek== | ==[https://www.psychoactif.org/forum/t34442-p1-Tuto-Culture-Champignons-Mexicains-Ecuador-Methode-PF-tek-mai.html#divx/ Réaliser une PF-Tek]== | ||
===Matériel nécessaire=== | ===Matériel nécessaire=== | ||
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[https://www.psychoactif.org/forum/t34442-p1-Tuto-Culture-Champignons-Mexicains-Ecuador-Methode-PF-tek-mai.html#divx Tutoriel complet pour réaliser un PF tek] | [https://www.psychoactif.org/forum/t34442-p1-Tuto-Culture-Champignons-Mexicains-Ecuador-Methode-PF-tek-mai.html#divx Tutoriel complet pour réaliser un PF tek] | ||
==Réaliser une culture sur Grains avant Monotube== | ==[https://www.psychoactif.org/forum/viewtopic.php?id=35726/ Réaliser une culture sur Grains de Seigle] (avant Monotube)== | ||
===Matériel nécessaire=== | ===Matériel nécessaire=== | ||
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Ne pas exposer les bocaux à la lumière directe du soleil | Ne pas exposer les bocaux à la lumière directe du soleil | ||
[https://www.psychoactif.org/forum/viewtopic.php?id=35726 Voir | [https://www.psychoactif.org/forum/viewtopic.php?id=35726 Voir un exemple plus complet de tutoriel pour réaliser une culture sur Grains] | ||
==Préparation du Monotube et Substract== | ==[https://www.psychoactif.org/forum/2023/06/07/Tutoriel-MONOTUB-tout-pour-culture-champi_70657_1.html#divx/ Préparation du Monotube] [https://www.psychoactif.org/forum/viewtopic.php?id=47404/ et Substract]== | ||
===Matériel nécessaire=== | ===Matériel nécessaire=== | ||
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Tutoriels pour [https://www.psychoactif.org/forum/2023/06/07/Tutoriel-MONOTUB-tout-pour-culture-champi_70657_1.html#divx fabrication du monotube] et sur [https://www.psychoactif.org/forum/2023/06/07/Tutoriel-MONOTUB-tout-pour-culture-champi_70657_1.html#divx les substrats] | Tutoriels pour [https://www.psychoactif.org/forum/2023/06/07/Tutoriel-MONOTUB-tout-pour-culture-champi_70657_1.html#divx fabrication du monotube]et sur [https://www.psychoactif.org/forum/2023/06/07/Tutoriel-MONOTUB-tout-pour-culture-champi_70657_1.html#divx les substrats] |
Dernière version du 2 juillet 2023 à 15:21
Étapes préparatoires pour chaque culture
- Nettoyer la pièce
- Se doucher, pas de bijoux, vêtements propres
- Mettre masque
- Désinfecter l’air
- Désinfecter le plan de travail
- Se laver les mains
- Nettoyer/Désinfecter gants avant de les enfiler
- Désinfecter les feuilles le materiel (Flamme puis alcool pour le scalpel)
- Utiliser de l'alcool à 70 degrés (plus efficace que celui à 90)
Idéalement on utilisera une autoclave, un flux laminaire ou un bec bunsen, ou encore une Glove box (Still Air Box)
Réaliser une Empreinte de spores
Matériel nécessaire
- 2 Feuilles d’aluminium découpées 10X10 par empreinte de spores
- Un Verre
- Champignon
- Scalpel ou couteau
- Sachet Zip
- Marqueur
Une fois que le champignon est ouvert
- Disposer une feuille d’alu sur le plan de travail propre (brillant vers le haut)
- Coupez près des lamelles le chapeau avec le scalpel
- Disposer sur l’alu
- Recouvrir avec le verre - Attendre 24 h
Le lendemain
- Retirer délicatement le verre, puis le chapeau du champignon (sans le faire frotter)
- Appliquer la deuxième feuille d’alu sur l’empreinte de spore (brillant vers le bas )
- Replier chaque bord et placer l’emreinte dans un sachet zip.
- Marquer avec date et contenant.
Conservation dans un endroit noir et sec (type boite à biscuit ou bas de frigo avec un sachet de silice) quasiment impérissable.
Réaliser une Seringue de spores
Matériel nécessaire
- Scalpel ou couteau
- Seringue stérile
- Empreinte de spores
- Eau stérile (stérile mais pas déminéralisée) eau robinet bouillie 10 mn.
- Petit récipient type shooter pour recevoir le mélange eau stérile/spores
Étapes pour réaliser la seringue
- Verser l’eau stérile dans le shooter
- Sortir l’empreinte du zip et décoller les spores avec le scalpel en versant dans le shooter.
- A l’aide de la seringue, pomper et videz le contenu du verre plusieurs pour mélanger les spores dans le liquide.
- Une fois la seringue remplie, la placer dans un sachet zip
- Attendre 24h 48h ou 72h selon votre patience température ambiante, noir et au sec pour que les spores se réhydratent.
Après l’attente, placer le sachet zip au frigo Conservation : 1 an max
Réaliser une Culture Liquide
Avantages par rapport à la seringue de spores :
- Pas besoin d’attendre l’hydratation des spores (gain de temps si objectif rentabilité)
- Création d’un mycélyum mono spore possible (à partir d’un seul champignon/clone) contrairement à une seringue qui produira une culture multispores (gain de productivité si objectif rentabilité)
Matériel nécessaire
- Sirop de glucose (grenadine, etc…)
- Bocaux pour culture liquide
- Fait tout ou autoclave
- Morceaux de verre
- 4 à 7% de glucides (en volume) dans de l'eau stérile mais pas déminéralisée.
Mesurer les dosages : bocal d’1L = 96 cl d’eau + 4 cl de sirop 4 cl de sirop égale 8 cuillères à café égale environ 3 cuillères à soupe
- Mélanger l’eau, le glucose et les morceaux de verre dans le bocal prévu pour la CL. Les morceaux de verre serviront plus tard pour « casser » le mycélium et ainsi accélérer sa croissance.
- Recouvrir chaque trou avec deux couches de ruban micropore et recouvrir le couvercle avec 2 feuilles d'aluminium.
- A la cocotte minute ou au fait-tout, amener à ébullition et laisser les pots mijoter pendant 20 mn pas plus pour ne pas « cuire » le sucre.
Étapes d’inoculation pour créer le mycélium dans la CL
Pour ce faire, plusieurs possibilités :
- Injecter quelques gouttes (environ 2 ml) de spores liquides pour faire de la CL qu'on appellera multispores (moins productive mais plus simple).
- Injecter quelques gouttes d'une autre CL sous forme de seringue pour la dupliquer
- Ouvrir le pot et mettre directement dedans un morceau de sclérote ou de champignon. Idéalement devant un flux laminaire ou éventuellement glovebox si vous travaillez vraiment rapidement et proprement, ou encore à la flamme bec bunsen.
- Pomper genre 20ml de CL vierge, injecter cela dans un pot de grain 100% colonisé et préalablement séparé, bien mélanger et ressucer la CL qui contient maintenant du bon mycélium tout frais et garanti sans contamination (si du moins on est très propre pendant cette opération, qu'on stérilise bien l'aiguille à la flamme et qu'on nettoie bien les ports d'injection à l'alcool à 70°)
Etapes Finales
- Mettre les pots dans un incubateur à la température voulue pour la variété cultivée (26°C pour les sclérotes - Ps. Mexicana et 28°C pour les Ps.Cubensis)
- Mélanger la CL avec un mouvement de rotation 2 ou 3x par jour.
En moins d'une semaine, la CL est 100% colonisée, prête à être sucée dans une seringue et injectée dans des pots de grain - un pot d'1L de grain avec de la CL est colonisé en a peu entre 7 et 10j !)
Pour plus d'info voir le tutoriel Réaliser une culture liquide
Réaliser une PF-Tek
Matériel nécessaire
- Seringue de spores ou Cl
- Bocaux verres
- Vermiculite
- Farine de riz complet bio
- Fait tout ou auto clave
- Ruban micropore
Etapes pour réaliser la PF-Tek
- Calculer les dosages :
Le ratio pour le mélange est : - 4 parts de vermiculite. -1.5 parts de farine. -1.5 parts d’eau. Pour un pot d’un litre remplit trois quart = 750g / 7 = 107g la part environ Soit : Vermiculite = 4X107g = 428 grammes Farine = 1.5X107g = 160 grammes Eau = 1.5X107g = 160 grammes = 16 cl
- Versez l'eau doucement sur la vermiculite tout en mélangeant avec une cuillère (attention à ne pas mettre plus d'eau que la vermiculite ne puisse absorber).
- Ajouter la farine et mélanger afin obtenir un mélange bien homogène.
- Remplir les bocaux
Faire attention à ne pas laisser de substrat sur le bord supérieur du bocal.
- Rajoutez le dernier centimètre libre du pot avec de la vermiculite sèche puis refermer le pot.
- Recouvrir avec deux couches de ruban micropore et recouvrir le couvercle avec 2 feuilles d'aluminium.
- A l’auto-clave, porter à ébulition pendant 90 mn ou 3h30 au fait-tout.
- Attendre le refroidissement des pots.
Si possible pratiquer l’étape suivante devant un flux laminaire ou bien flamme bunsen
- Retirer l’alu
- Appliquer de l’alcool sur l’aiguille de la seringue, puis chauffer à la flamme (A prariquer entre chaque inoculation de pot !!!).
- Inoculer la seringue de spore ou culture liquide environ 2 ml dans chaque pot.
- Replacer du ruban multipore et l’alu
- Placer en incubateur à 28 degrés
Au bout de quelques jours on voit apparaître le mycélium. Lorsque celui-ci à contaminé entre 30% a 50% du pot (environ 10j), le secouer. Une fois 100% contaminé, entreposer les bocaux à une température entre 21 et 23°C. Ne pas exposer les bocaux à la lumière directe du soleil
Tutoriel complet pour réaliser un PF tek
Réaliser une culture sur Grains de Seigle (avant Monotube)
Matériel nécessaire
- Seringue de spores ou de Culture liquide
- Grains de seigle bio
- Bocaux verre
- Passoire
- Fait tout, dans l’idéal grosse autoclave
- Gypse, platre ou sulfate de calcium déshydraté
- Café
Etapes pour réaliser une culture sur Grains avant Monotube
- Mesurer le volume nécessaire de grains
Pour un pot d’un litre remplit trois quart = 750g/2.5 (gonflement du grain sec) = 300 g de grains secs par bocal Exemple : 300g X 6 bocaux = 1800 gr ou 1.8 kg ou 1.8 l 300 X 4 bocaux = 1200 gr ou 1.2kg
- Rincer plusieurs fois les grains de seigle à la passoire
- Placer les Grains dans le fait tout
3 volumes de mélange liquide (eau chaude/café) pour un volume de grains Exemple : 1.8l X 3 = 5.4 l
- Recouvrir les grains avec le mélange liquide (eau café)
- Ajouter cuillères de gypse (plâtre, - CaSO4 2H2O.) Environ 1 cuillère à soupe pour 2kg de grains
- Porter à ébullition et couper le feu.
- Laisser tremper 4 a 12h
- Idéalement, changer l'eau pour la cuisson finale de 10 minutes afin de virer l'amidon (les grains colleront beaucoup moins et seront plus faciles à sécher juste après la cuisson).
- Porter à ébullition 10 mn pas plus afin de ne pas faire éclater les grains
- Verser le grain bouillant dans les passoires
- Passer de l'eau très chaude dessus pour enlever l'excès de gypse et de café afin que les grains ne collent pas une fois secs en surface
- Faire sécher sur une serviette
- Rajouter une bonne grosse cuillère de gypse aux grains
Avant de remplir les bocaux, le seigle doit être froid et "sec" en surface, au toucher.
- Remplis les bocaux aux 3/4 car il faudra "casser" le pour accélérer la colonisation et vérifier qu'il n'y a pas de contaminations internes
Faire attention à ne pas laisser de substrat sur le bord supérieur du bocal.
- Recouvrir avec deux couches de ruban micropore et recouvrir le couvercle avec 2 feuilles d'aluminium..
- Porter à ébulition pendant 90 mn à l’autoclave ou 3h30 au fait-tout.
- Attendre le refroidissement des pots.
Si possible pratiquer l’étape suivante devant un flux laminaire ou bien flamme bunsen
- Retirer l’alu
- Appliquer de l’alcool sur l’aiguille de la seringue, puis chauffer à la flamme (A pratiquer entre chaque inoculation de pot !).
- Inoculer la seringue de spore ou culture liquide environ 2 ml dans chaque pot.
- Replacer le scotch multipore et l’alu
- Placer en incubateur à 28 degrés
Au bout de quelques jours on voit apparaître le mycélium. Lorsque celui-ci à contaminé entre 30% a 50% du pot (normalement après 10j), le secouer. Une fois 100% contaminé, entreposer les bocaux à une température normale (à peu près à 21°C). Ne pas exposer les bocaux à la lumière directe du soleil
Voir un exemple plus complet de tutoriel pour réaliser une culture sur Grains
Préparation du Monotube et Substract
Matériel nécessaire
- Une boite en plastique transparente
- une perceuse
- Un sac poubelle ou autre plastique opaque
- du scotch de peintre
- du scotch micropore
- 2 part de substrat humidifié pasteurisé ou stérilisé du grain
- 1 part de mycelium sur grains
Fabrication du Monotub
- Marquer l’emplacement des trous.
Une ligne de petit trous sur le pourtour de la boite, 2 cm au dessus de la surface du substrat. Les grands trous se situeront en haut de la boite. Si votre boite est grande, faites des trous à chaque coin supérieur de chaque face, donc 8 au total. Si vous avex une petite boite, faites des trous sur seulement les deux faces les plus éloignées,donc 4 au total.
- Percer les trous
Préparation du susbtrat
Il faut humidifier votre substrat avec la bonne quantité d’eau et ensuite le stériliser, ou les deux en même temps.
Si vous avez 1kg de mélange fibre coco vermiculite (50/50) que vous souhaitez humidifer à 75%. Il faut rajouter 3kg d'eau, pour un total de 4kg de substrat humidifié.
Vous pouvez ensuite stériliser ce mélange a l’autoclave minute dans un sac résistant à la chaleur. L'autre solution est de verser tout simplement de l'eau bouillante sur le substrat plaçé dans un récipient préalablement nettoyé à l'alcool pour le pasteurisé.
Préparation du monotube
- Nettoyez le monotub. L'intérieur et l'extérieur, deux fois d'affilé, sans oublier le moindre recoin, ainsi que le couvercle.
- Munissez vous du scotch de peintre et couvrez par l'extérieur tout les trous du monotub (les grands et les petits).
- Découpez le sacs poubelle afin de recouvrir le fond du monotub avec une seule couche de plastique
- Placez le plastique noir dans le fond du monotub.
Procéder au Casing
- une couche de substrat dans le fond de la boite sur le plastique noir.
- une couche de mycélium sur grain.
Continuez comme cela jusqu'à épuisement des deux ou jusqu'à ce que vous arriviez au niveau des trous.
- Mélangez bien le tout avec vos mains pour répartir au maximum les grains dans le substrat.
- Égalisez la surface puis refermez la boite.
Placez la en incubation entre 26 et 28 degrés N'ouvrez pas la boite pendant au moins 2 semaines ou jusqu'à colonisation complète du substrat. C'est à dire jusqu'à ce que vous voyiez une couche de mycélium blanc recouvrant la surface.
Fructification
- Placez la boite à la lumière indirecte du soleil.
- Retirez le scotch de peintre.
- Remplacez le par le bandage microporeux.
Vous verrez apparaître les premiers primordia après 7 à 14 jours. Les champignons mature quelques jours plus tard.
Tutoriels pour fabrication du monotubeet sur les substrats