[ Culture ]

Aide, PF-tek contaminée à chaque fois

RÜBBEN a écrit

Salutation, j’aurais besoin d’aide pour identifier ce que je fais mal dans ma PF-Tek, ça fait deux fois que je test et malgré mes précautions, deux fois que c’est contaminé (moisissure verte).
je vous décris le processus que j’utilise : je mélange vermiculite et perlite avec de l’eau et de la farine de riz complet bio, ensuite je met dans des pots de confiture dont les couvercles sont troués (recouvert par un scotch). Ensuite 1h30 a la cocotte, puis je laisse tout dedans redescendre a température pendant la nuit. (jusque là j’pense que j’ai tout bon).
Ensuite le lendemain je nettoie ma table avec de l’alcool a bruler, je met des gants et un masque. Je sort mon empreinte de spore (faite en début d’année a partir d’un grow kit de Z…) et je gratte l’empreinte dans un flacon remplis d’eau stérile ( je l’ai fait bouillir avant du coup ça devrais etre stérile logiquement).
Puis je sort les pots de la cocote minute, je décolle le scotch et j’inocule le bocal puis je remet le scotch. La il y a peu etre un problème dans ma procédure, parsque j’utilise une seringue en plastique nettoyé au préalable a l’eau bouillante, puis je fait passer un chalumeau sur le bout pour bien la « stérisliser », problème vu que j’ai pas de seringue avec un bout en métal je le chauffe pas a rouge (les problèmes viendrais ils de la ?)
Ensuite je fous tout dans une pièce avec une serviette dessus et le chauffage a balle malheuresement je sais pas exactement quelle température ça atteint (autre possible problème), et après 2/3j, bha ça manque pas c’est contaminé.
Du coup selon vous es ce que mon problème peu venir, de la seringue, de la température, ou d’autre part ?

Merci d'avance a ceux qui me répondrons

D'une certaine manière tu réponds un peu à tes propres  interrogations dans ton post, je vais te donner mon  avis  mais il y a des gens plus compétents que  moi pour répondre plus en détails .
Si ta cocotte est bien sous pression 1h30 c'est nickel, si tu t'en sers comme d'un fait tout sans pression il faut 3h30.
Ce n'est probablement pas un problème  de spores, en revanche tu dois laisser le temps aux spores de se "réhydrater" cela prends de 24 à 48h une fois dans le liquide je pense que si tes spores ne sont pas hydratés cela laisse plus de place aux autres "contaminant" pour prendre le dessus, je ne suis même pas sûr qu'elles puissent se développer sans ça.
Le fait que tu utilise de l'alcool à bruler est effectivement un problème (alcool à 90 la plupart du temp) il est moins efficace que l'alcool à 70 (il pénètre mieux dans la couche aqueuse qui protège les bactéries). Du coup cumulé avec ta seringue en plastique ca augmente les risques.
L'idéal est d'inoculer devant un flux laminaire (pro) ou devant une flamme bec bunsen (système D).
Quant à la température de ta pièce c'est un peu hasardeux mais cela influe davantage sur le temps de développement de ton mycélium (donc indirectement si ton mycélium met trop de temps à se développer cela laisse plus de place aux autres contaminants), c'est à rectifier mais si ca contamine en deux jours ce n'est pas forcément un soucis de température. La fabrication d'un incubateur (désinfecté à l'alcool à 70) serait important je pense, il y a des tutos sur le forum pour ça.

J'espère que cela va te donner des petites pistes mais attends peut-être les avis des autres psychonautes. Il faut continuer d'essayer courage !!!

Dernière modification par Ergot des Aigles (09 mai 2023 à  21:33)

Moi de mon côté je vois plusieurs problèmes dans ta méthode.

Premièrement je ne vois pas de travail en condition de stérilité pour les étapes critiques à savoir préparation des seringues et mise en solution des spores. Il faut à minima un SAB (Still air box) ce qui est ni plus ni moins une boite en plastique retournée avec des trous dedans qui est bien désinfectée au préalable. Ca coûte pas grand chose à faire et ça aide grandement. Après il y a aussi le bec Bunsen qui te permet de travailler dans un cône de stérilité mais c'est déjà un peu plus onéreux.   

De deux les empruntes de spores ne sont jamais réellement propres de base, surtout si tu les as faites toi même dans des conditions loin de celles de la stérilité. Peut-être qu'acheter une seringue de spores sur un site, ou même si tu trouves des seringues de mycélium clean (c'est plus compliqué à trouver) ça peut t'éviter beaucoup de facteurs hasardeux. 
Pour moi il faut impérativement passer par un travail sur gélose si tu veux partir d'une emprunte en limitant les risques de cultiver des contaminations. J'avais fait un tutoriel sur le sujet pour faire ça en mode DIY à moindre coût:
https://www.psychoactif.org/forum/viewt … d=65863#zz

L'autre problème que je vois aussi, c'est que ton eau bouillante n'est très certainement pas stérile, même à 100° certaines bactéries, spores ou chamignons survivent d'ou l'intérêt d'ajouter de la pression avec l'autocuiseur pour en éliminer au maximum. Il faut elle aussi la passer à l'autocuiseur dans un récipient. De même pour tes seringues, si elles ne sont pas neuves, il faut aussi les passer à l'autocuiseur en prenant soin de les emballer dans du papier aluminium.
Puis les aiguilles aussi ça me semble plutôt nécessaire de les passer à la flamme donc il faut t'en procurer aussi (en pharmacie ou sur internet tu peux trouver seringues et aiguilles).
Puis je me demande aussi à quoi sert ta perlite dans ta recette de PF-Tek ?

Et comme le souligne Ergot des Aigles l'alcool à bruler ou à 90 c'est pas le top pour la mycologie, c'est l'alcool à 70° qu'il faut. Puis l'hydratation des spores n'est pas à négliger non plus c'est un facteur qui a aussi son importance.

Donc pour réussir, je te conseille soit de sauter toute une partie du "fait maison" c'est à dire préparation des seringues à partir des empruntes en partant de seringues toutes faites

ou alors si tu tiens réellement à faire tout tout seul je te recommande très fortement de faire germer tes spores sur agar-agar pour t'assurer un mycélium sans contamination pour ensuite faire des cultures liquides.

Plein de courage à toi dans cette aventure :)

si jamais tu te lances dans  la  SAB,  tamas à fait un tuto sympa y'a pas longtemps
https://www.psychoactif.org/forum/viewt … =1#p625996

Merci beaucoup a vous deux pour vos précieux conseils!
Je vais essayer d'améliorer ma méthode, et si j'ai d'autre problème je reviendrais vous embêter.
Ps: le mélange perlite-vermiculite 100L à 24€ chez L***y M****n contre 15 balles le sac de 5L de juste vermiculite (même magasin), du coup voilà

RÜBBEN a écrit

C'est bon je me suis équipé correctement, me manquerais plus qu'un flux laminaire ou un bec bensen. Je vais pas trop etre chez moi a partir de juin et après il fera trop chaud, je reporte donc la culture a septembre prochain.
Merci de vos conseils, j'vous tiendrais au courant de si ça marche quand je réessaie en septembre

Si  jamais tu as la motiv pour un petit "journal de culutre" on est nombreux à être fan ^^
J'en ferais peutetre un  petit d'ici  deux semaines